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TweenTrap 色譜柱

TweenTrap 色譜柱

  賽分科技TweenTrap 色譜柱是專為去除水性樣品中的表面活性劑(例如吐溫)而設(shè)計(jì)的。填料是由剛性、球形、高交聯(lián)度、粒徑為5 µm的PS/DVB制成。將專有的表面涂層共價(jià)鍵合到PS/DVB載體上,從而實(shí)現(xiàn)極高的穩(wěn)定性及對(duì)目標(biāo)化合物的最小非特異性結(jié)合。共價(jià)結(jié)合的兩親官能團(tuán)能夠吸附脂溶性和水溶性的去污劑(例如吐溫)。色譜柱兼容于大多數(shù)水相緩沖液,比如醋酸鹽、磷酸鹽、Tris和其他。

  TweenTrap 色譜柱可以與SEC色譜柱串聯(lián)運(yùn)行水性樣品,并且專門設(shè)計(jì)用于收集和去除表面活性劑,比如干擾蛋白質(zhì)SEC定量分析的聚山梨酯 80/20(吐溫 80/吐溫20)。為了獲得最佳結(jié)果,建議TweenTrap運(yùn)行水基流動(dòng)相,不添加有機(jī)溶劑。

產(chǎn)品特點(diǎn)
  • 穩(wěn)定性高
  • 非特異性結(jié)合小

  如圖1和圖2所示,賽分Tween Trap色譜柱在市售重組單克隆抗體(mAb)西妥昔單抗的二聚體與單體分布的譜圖中能夠最小化吐溫的干擾。

1.jpg

圖1. TweenTrap色譜柱在西妥昔單抗的SEC分析中的影響

色譜柱: TweenTrap

流動(dòng)相: 150 mM Sodium phosphate, pH7.0

流速: 1 mL/min

柱溫: 室溫

檢測(cè)波長(zhǎng): UV 214 nm

進(jìn)樣體積: 100 µL

樣品: 如圖所示

圖2. 圖1的放大交錯(cuò)視圖

1.jpg

  線 1 顯示了單獨(dú)西妥昔單抗的 SEC分析(不含吐溫)。單體前面可以看見(jiàn)清晰的聚集峰。

  線 2 顯示了0.04% 吐溫80中西妥昔單抗的SEC分析(未串聯(lián)TweenTrap色譜柱)。根據(jù)只含吐溫80的色譜圖(線 3 ),聚集峰的左邊肩前應(yīng)該是吐溫80。這表明吐溫80可能會(huì)干擾西妥昔單抗的定量分析。

  線 5顯示了吐溫80干擾最小化的曲線,這是由于串聯(lián)了賽分TweenTrap色譜柱。以同樣的色譜柱條件再運(yùn)行一遍僅含西妥昔單抗、不含吐溫80的樣品,進(jìn)一步證明了這一點(diǎn) (線 4)。

  因此,圖1和圖2中的色譜疊加圖有助于證明西妥昔單抗樣品中吐溫80是如何被截留在賽分TweenTrap色譜柱上,同時(shí)仍然可以有效的分辨和積分聚集峰。可以看到西妥昔單抗聚集體在所有線上的峰型略有不同,這可能歸因于TweenTrap色譜柱上西妥昔單抗聚集體的相互作用,或者是因?yàn)樵黾恿松V柱死體積,用戶可能需要對(duì)這種效果采取預(yù)防措施。

技術(shù)參數(shù)

產(chǎn)品名稱 TweenTrap
填料 高度交聯(lián)的PS/DVB樹(shù)脂載體接枝有致密堆積的納米級(jí)厚度兩親涂層
粒徑 5 µm
孔結(jié)構(gòu) 無(wú)孔
pH穩(wěn)定性 2-13
操作溫度極限 80℃
操作壓力極限 5000 psi(344bar)
流動(dòng)相兼容性 典型緩沖液:磷酸鹽、Tris和乙酸鹽。有機(jī)添加劑會(huì)洗掉Tween和其他表面活性劑
流速 色譜柱內(nèi)徑為4.6 mm時(shí)通常為0.1-1.0 mL/min
4.6 x 35 mm色譜柱默認(rèn)容量
吐溫 80 濃度 進(jìn)樣體積 #達(dá)到色譜柱容量之前的進(jìn)樣量
0.01% 100 µL 20
0.04% 100 µL 5
性能特點(diǎn)
訂購(gòu)信息
產(chǎn)品名稱 內(nèi)徑*長(zhǎng)度 訂貨號(hào)
TweenTrap 4.6×35mm 010054-4603
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